***酸酚棉蓝(LPCB)染色是一种简单的***学染色方法,用于真菌的显微镜检查和鉴定。
***酸酚棉蓝(LPCB)染色的原理是基于辅助鉴定真菌细胞壁。菌孢子细胞壁由几丁质组成,***酸酚棉蓝溶液可对其进行染色鉴定。***酸酚棉蓝能将真菌孢子和结构染色蓝色,看起来像菌丝一样。
***酸酚棉蓝(LPCB)染色液配制方法:
50mL蒸馏水
0/125克棉蓝(苯胺蓝)
50g晶体酚(C6H5O4)
100mL***
50mL***酸(CH3CHOH-COOH)
70%乙醇
注意:***酸酚棉蓝溶液至少在使用前2天配制。
图1:***酸酚棉蓝染色的短帚霉(图片来源于stylish streaking和Senthil Prabhu)
***酸酚棉蓝染色步骤:
1/在一个干净的显微玻璃载玻片上,加入一滴70%的乙醇。
2/ 根据使用的样品,使用无菌封片机(例如接种环(来自固体培养基))将真菌标本添加到酒精滴中。
3/ 使用针挑拨真菌样品,以确保样品与酒精充分混合。
4/ 使用滴管或移液管,在乙醇干燥之前加入一两滴***酚棉蓝溶液。
5/ 用干净的无菌盖玻片小心地覆盖,不要产生气泡。
6/在40X显微镜下检查染色,以观察真菌孢子和其他真菌结构
结果分析:真菌孢子、菌丝和子实体结构染成蓝色,而背景染成淡蓝色。例如:黑曲霉将菌丝和子实体结构染成精致的蓝色,带有淡蓝色背景。毛癣菌还使菌丝和子实体结构染成精致的蓝色,背景为淡蓝色。
不足:
1/ 它只能用作真菌的初步识别,应使用其他检测工具(如生化和培养检查)进一步确定。
2/ 该溶液可能会破坏真菌的原始形态。
3/ 染色剂只能用于识别成熟的真菌及其结构,而不能用于识别真菌的年轻营养形式。
4/ 染色不能长时间保存。
***酸酚棉蓝染色的应用:
1/ 可用于鉴定可疑真菌样品。
2/ 真菌及其结构的一般鉴定。
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