抽提细胞内总RNA可以用Trizol法或者用商品化的试剂盒。
用试剂盒法提取细胞RNA步骤：
（1）取250μL裂解液RL和5/6μLCarrier RNA溶液混合，加入干净的1/5mL离心管中。向离心管中加入140μL细胞，涡旋振荡15s混匀。
（2）室温（15-25℃）孵育10min，简短离心收集附着在管壁和管盖上的液体。
（3）加入560μL***，涡旋振荡15s，简短离心收集附着在管壁和管盖上的液体。
（4）将离心管中的液体转移到RNase-Free吸附柱CR2中，8000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
（5）将剩余液体按步骤（5）再次过柱。
（6）打开吸附柱盖子，加入500μL溶液GD（使用前加入***），8000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
（7）加入500μL溶液RW（使用前加入***），8000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱放回收集管。
（8）重复步骤（8）。
（9）12000rpm离心3min，使吸附莫完全变干，弃废液。
（10）将吸附柱放入一个1/5mL的RNase-Free离心管，向吸附膜的中间部位悬空滴加60μL RNase-Free ddH2O/盖上盖子，室温放置5min，8000rpm离心1min，弃去吸附柱，离心管中为提取的293T细胞RNA。
反转录步骤：
图1：反转录体系
42℃反应1h，72℃反应10min。反转录得到cDNA-20℃保存。
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