上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 1 奶牛冬痢奶牛冬痢预防控制技术预防控制技术要点要点 奶牛冬痢是成年奶牛的一种重要传染病 近二十年来在国内奶牛 养殖业屡见不鲜 并逐渐得到重视 在我国 冬痢在各地都有发生 包括南方的广东等地 但以北方多见 本技术要点是上海市奶牛研究所兽医疾病控制中心依据近 5 年 研究成果 并综合了国内外最新科研成果而提出的 希望为控制我国 南方地区奶牛冬痢提供理论依据和技术支持 一 病原研究进展一 病原研究进展 1 流行情况 早在 1931 年美国就有奶牛冬痢相关报道 当时还没有明确提出 冬痢 WD Winter Dysentery 的概念 报道的是奶牛冬天大规模的由肠 道紊乱引起的肠炎和腹泻 在以后的几十年间 日本 澳大利亚 瑞 典 加拿大 美国 韩国 英国及新西兰等国陆续有相关的研究报道 2 临***症状 奶牛冬痢主要症状是牛群出现暴发性的水样腹泻 并迅速播及全 群 粪便中常含有粘液和血液 同时伴有奶产量急剧下降 25 95 有时奶牛会出现脱水 精神沉郁 食欲下降和轻微的呼吸系统症状 如 咳嗽 多数情况下牛只直肠温度和瘤胃功能正常 冬痢发病率很高 在 1 个泌***牛群中几天之内可能同时出现 20 50 的牛发病 1 2 周左右几乎 100 的泌***奶牛都会发病 但死亡率 上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 2 很低 个体牛只通常情况下 1 3 天左右会粪便会逐渐恢复正常 但奶 产量的恢复需要几周时间 同样的牛群可能会具有 1 5 年的免疫力 有报道称约有 31 的冬痢牛群暴发犊牛腹泻 3 病原研究 最早的报道怀疑奶牛冬痢是由弯曲杆菌引起的 随即有人认为根 据其发病规律 病原更应该是传染性极强的病*** 近年来大量报道普 遍认为其主要是由牛冠状病*** BCV 感染引起的 因为绝大多数冬 痢粪便样品中都可以通过电镜观察到冠状病***粒子 极少分离到弯曲 杆菌 而且通常在正常奶牛肠道中可以发现很多弯曲杆菌 其致病性 值得怀疑 还有研究发现 使用电镜在粪便样品中观察到的一些冠状病***样 粒子 但使用 BCV 免疫电镜检查为***性 认为可能是冠状病***科凸 隆病***属的病*** 该病***可能也引起奶牛腹泻 当牧场 BCV 和 BVDV 抗体检测均为阳性时 暴发的冬痢更为严重 表明严重的冬痢可能是 多种病原混合作用的结果 通过双份血清中和抗体试验检测证明冬痢 发病牛只 BCV 中和抗体水平比同群正常牛只升高了 4 倍 这种针对 BCV 的血清学变化也为 BCV 为冬痢病原提供了有力的佐证 上海市奶牛研究所对上海地区发生冬痢 9 个牧场采取血清样品 使用 ELISA 方法对其中的 BCV 抗体进行检测发现所有牧场 BCV 抗 体均为阳性 同各个牧场都有冬痢发生一致 结合多项研究认为 我 国南方地区奶牛冬痢的元凶为冠状病*** BCV 和轮状病*** BRV 混合感染 感染途径为病牛或带***牛粪便污染的水和食物 上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 3 4 发病机理 病***可经口或呼吸道感染 冠状病***在成母牛上引起的病理变化 与犊牛冠状病***感染非常相似 病***首先感染小肠近侧端 然后向下 扩散至整个小肠和大肠 在肠道表面上皮细胞和小肠远端肠绒毛上皮 细胞中复制 感染细胞发生死亡 脱落 被未成熟细胞代替 小肠的 这些变化导致肠绒毛生长受阻 相邻的肠绒毛融合 在大肠致使结肠 嵴萎缩 小肠绒毛和结肠嵴上柱状上皮细胞被立方上皮和鳞状上皮细 胞代替 感染严重的细胞可完全脱落 杯状细胞数量减少 肠细胞上 的微绒毛的长度和大小差别显著 肠表面积的减少和未成熟细胞的存 在使肠道吸收能力大大降低 未成熟的细胞不能分泌正常消化酶 致 使肠道消化能力降低 未被消化的***糖积聚 导致微生物活动增加 渗透作用失衡 致使更多的水分进入肠腔 消化吸收能力降低而致腹 泻 水分和电解质丢失 这就是为什么冬痢会以大量水样腹泄为临***特征的原因 5 诊断方法 冬痢通过临***症状和流行病学即可作出诊断 病原的确定需要进 行实验室检测 5 1 电镜检测 将粪便样品处理后使用电镜直接观察 DEM 是早期检测粪便中的 冠状病***粒子的有效方法 得到了广泛的运用 免疫电镜 PAG IEM 可提高 BCV 检测的特异性 因为免疫电镜比电镜直接检测更加敏感 上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 4 5 2 间接凝集试验 可使用间接凝集试验检测牛冠状病*** 如 BCV 可以凝集大鼠的 红细胞 此外还可以使用***胶凝集试验来检测粪便中的病***粒子 5 3 中和抗体 采用双份血清检测中和抗体水平可以有效的判断牛只 BCV 感染 情况 冬痢牛只发病时 BCV 抗体水平呈明显上升趋势 5 4 ELISA 近年来 ELISA 因其特异性较高且可以高通量检测而被作为很多 传染病的检测方法得到广泛运用 可以使用犊牛腹泻 BCV 作为抗原 建立 ELISA 方法检测冬痢牛只 BCV 血清抗体 这也证明犊牛腹泻 BCV 和成母牛冬痢 BCV 有相关性 5 5 病原分离 使用 MDBK Vero 和 HCT 8 细胞等可以用于病***的分离培养 牛冠状病***的分离通常需要在培养液中加入适量胰酶 上海市奶牛研 究所曾采取冬痢牛只粪便进行病***分离 在 HCT 8 细胞上出现 CPE 5 6 PCR PCR 作为快速诊断方法因期特异性和敏感性高也被用于 BCV 的 检测 使用 RT PCR 和巢式 PCR 是检测冬痢粪便样品中 BCV 的有效 方法 上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 5 二 预防控制体系二 预防控制体系 作为一种病程短 危害大 通常情况下症状轻微能自愈的一过性 高度传染性疾病 预防应重于治疗 1 生物安全 对于从未发生过冬痢的奶牛场来说需要注意的是生物安全 人 员 牛只和车辆的流动是关键 带***的牛只 来到访人员的鞋底和车 辆的轮胎是消***的重点 因此 在冬痢易发的季节更要加强消*** 要求自每年 12 月份开始至次年 4 月份 应禁止牛只的相互调动 应禁止外来人员进入牧场 场内工作人员也应减少与其它牧场工作人 员接触和交流 更不应串场 外来车辆禁止入内 奶罐车进入需严格 消*** 尤其是轮胎应反复消*** 淘汰牛只车辆禁止进入场内装牛 如 果周围有牧场发生冬痢 本场需立即封闭 并进行全场消*** 并及时 喂以缓解症状的添加剂 2 饲养管理 对于 BCV 阳性的牛群来说 冷应激 饲料不佳或配方改变 牛 群免疫力下降等因素都可以诱发冬痢 有研究表明 人工口服 BCV 的牛只在冰水***下可以复制出冬痢症状 栓系的牛群发病率高于自 由卧***的牛群 料槽受清粪工具污染也易发冬痢 临***上正常奶牛的粪便中也分离到冠状病*** 特别是冬天会通过 粪便向环境中排放大量病*** 在分娩的时候约有 70 的感染奶牛向外 排*** 因此 感染 BCV 的健康牛群是否都会发生冬痢 有哪些诱因 还需要进一步的研究 上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 6 目前还没有其它特别的预防方法 主要以加强饲养管理 重点包 括 1 增强奶牛机体抵抗力 每年 12 月到第二年 2 月底 可以在 饲料中添加增强机体免疫力的功能性添加剂 2 饲料配合合理 稳 定 避免饲料原料和配方的大幅调整 3 禁止饲喂发霉变质饲料 4 加强保暖工作 防止冷应激 此外 应加强消*** 粪便的安全 处理 粪道的定期消*** 病牛的及时隔离处理等也至关重要 3 治疗 冬痢牛只病程在 1 3 天左右 暂没有特殊有效的治疗药物 也没 有研究报道治疗能缩短个体和群体发病病程 对于个别严重的病例主 要使用支持疗法 并使用止泻收敛药物 有使用磺胺二甲基嘧啶无效 果的报道 国内的治疗常报道在精料中添加***哌酸 也有使用青霉素 治疗的 上海市奶牛研究所曾在一项活性肽对免疫功能提高的试验研究 中 发现使用这类饲料添加剂可以缓解冬痢奶牛的症状及降低产量损 失 并正据此采取活性生物因子 免疫增强剂和内***素吸附剂等生物 制剂进行复方配伍 目前正进行更进一步的研究和实验中 4 ***前景 奶牛 BCV 抗体在冬痢发生 1 年后还处于很高的滴度 通过初*** 被动免疫的小牛在 5 月龄时 BCV 抗体反应呈阳性 单纯由 BCV 引 起的冬痢对该病***具有一定的免疫力 表现为 1 5 年发病一次 当奶 牛血凝抑制试验抗体滴度低于 80 或时者中和试验抗体效价小于 160 时会再次感染 BCV 有研究报道高浓度的抗原油剂混合苗免疫牛只 上海市奶牛研究技术文件 奶牛冬痢技术要点 2012 1201 内部资料 主要保管 7 后 血凝抑制试验抗体效价大于 160 或中和试验抗体效价大于 640 的 牛只对冬痢具有抵抗力 但田间试验效果未得到证实 美国 德国和西班牙研究的牛冠状病****** 主要用于小牛而不 是成母牛 但是效果还不确定 三 三 冬痢冬痢出现出现时的应急预案时的应急预案 1 立即准备牛舍 隔离发病牛只 2 立即进行全场大消*** 牛舍卧*** 粪沟 粪道立即使用烧碱 进行消*** 在冬痢流行期间每天用烧碱对粪沟和粪道进行消*** 3 立即上报相关领导和职能部门 并通知邻近其
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