土壤中淀粉酶菌株的筛选

时间:2022-08-19 02:13:07  热度:1°C
土壤中高产淀粉酶菌株的筛选方案:一、实验材料样品/四川化工职业技术学院采集的土样若干试剂/营养琼脂、淀粉、土壤、碘液等仪器:高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱/移液管、培养皿、试管、三角瓶、量筒、酒精灯、接种环等液体培养基/淀粉10g、硫酸铵10g、***化钠5g、硫酸0/5g、***酸氢二钾1g、牛肉膏1g,定容1L二/实验步骤(一)培养基的配置1/称量 按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。2/溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,应控制火力并需不断搅拌/以防琼脂糊底烧焦。3/分装 将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,分装三角***量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。4加塞 培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染。5/包扎 加塞后,将全部试管和三角瓶用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层报纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。培养皿、移液管、涂布棒用报纸包扎好。试管里面加入45ml自来水,三角瓶里面加入90ml自来水和玻璃珠,加塞,包扎。6/灭菌 将上述培养基及其仪器1213,20分钟高压蒸汽灭菌。7/搁置斜面及倒平板 将灭菌的试管培养基冷至50左右(以防斜面上***水太多),将试管口一端搁置在书边上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。三角烧瓶里的培养基在超净工作台上倒平板,然后静止,待其凝固(二)产淀粉酶菌株的分离、纯化1/土样的采集(1)地点的选取:四川化工职业技术学院花园(潮湿)(2)采集时间/2013-9-58/00(3)采集原则:地点选取后,用小铲子出去5cm表土,取离地面5-20cm处的土,盛与袋中并标明时间,地点及环境情况。2/菌悬液的制备和梯度稀释(1)取10g土壤样品加入90ml无菌水中并放

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